产品货号:
JN5015
中文名称:
2×Complex Taq MasterMix(快速上样)
英文名称:
2×Complex Taq PCR Master Mix,Quick Load
产品规格:
5mL|25mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是由Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物,是2×Taq MasterMix(货号:JN0030)同一系列产品,其配方专门针对复杂模板扩增条件进行优化,具有更好的稳定性,更好的扩增特异性,可减少非特异性条带的扩增,能提高复杂模板及高GC含量模板的扩增效果。使用时,只需要加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。2×Complex Taq MasterMix提供普通型(货号:JN0034)/快速上样型(货号:JN5015,含蓝色染料)两种形式供您选择。经测试,高纯度染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。
- 适用于常规PCR鉴定及较短DNA片段的PCR克隆;
- 复杂模板特异性扩增;
- 平端PCR产物加A。
- 高效:以λDNA为模板,扩增长度可达8kb,能高效扩增4kb以下片段。
- 稳定:反复冻融几十次,4℃放置30天,室温放置一周后,扩增性能不受影响。
- 快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
- 便利:PCR反应后可直接电泳(含染料形式)。
组分 | 5mL | 25mL |
2×Complex Taq MasterMix(快速上样) | 5×1mL | 25×1mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
- 需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
- 应根据实验目的选择合适的循环数,循环数过少,会造成扩增量不足。循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩增。
- 根据引物Tm值设置合适的退火温度,退火温度过低,会造成非特异性扩增。退火温度过高,可能扩增不到目的条带。
- 使用本制品扩增得到的PCR产物具有3'端"A"突出,可直接克隆于T载体中;
- PCR的反应液请在冰上配制,置于PCR反应仪上进行;
- 如较高灵敏度PCR反应可选择2×Taq MasterMix;
- 如实验室长期需要对同一片段进行扩增,建议采用防污染PCR扩增检测2×PCR MasterMix(防污染,货号:JN0047),以避免PCR产物的气溶胶污染。
- 常用反应体系(50μL)
成分 用量 2×Complex Taq MasterMix(快速上样) 25μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 模板 1~50ng(质粒)
10ng~1μg(基因组)ddH2O 至50μL - 推荐PCR反应程序
- 当扩增片段<3K:
循环数 温度 时间 1 94℃ 90s 30 94℃ 20s 50~60℃ 20s 72℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温 - 当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
循环数 温度 时间 1 94℃ 5min 30 94℃ 5s 68℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温
- 当扩增片段<3K:
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